Thorough formalin fixation confers a protective effect for histochemical and immunohistochemical testing on tissues exposed to prolonged time in ethanol, xylene, heat, or paraffin.

چکیده اصلی

Tissue under- and over-processing in the histology laboratory, while decreasing in frequency, is still a valid concern and typically results from user or instrument error. This study evaluated the effects of extended exposure of histological tissues to processing reagents on specimen quality, including embedding, microtomy, histochemical staining, and immunohistochemistry (IHC). All specimens were fixed in neutral buffered formalin for 3-5 weeks prior to processing except for a subset of organs which underwent prolonged fixation for 1 year. Although overprocessing is traditionally associated with tissue hardening, brittleness, and shrinkage, these effects are often noted when fixation timing is not clearly defined. To simulate processing delays, specimens were subjected to an additional 24 h in absolute ethanol, xylene, molten paraffin, or a heated embedding station. Extended exposure to these reagents did not result in observable morphologic changes. Embedding quality, microtomy performance, and histochemical staining were consistent across all experimental conditions. Additionally, IHC antigenicity was largely preserved under most conditions. However, reduced or absent immunoreactivity was observed in select markers in organs fixed for 1 year, consistent with prior reports of fixation-related antigen masking and deterioration of antigenic sites. Unexpectedly, extended exposure to ethanol, xylene, or paraffin did not independently compromise IHC performance in adequately fixed specimens.

ترجمه فارسی چکیده

این مطالعه اثرات مواجهه طولانی‌مدت با مواد شیمیایی فرآیندی بر کیفیت نمونه‌ها، شامل جاسازی، میکروتومی، رنگ‌آمیزی هیستوشیمیایی و ایمونوهیستوشیمیایی (IHC) را ارزیابی کرد. تمام نمونه‌ها به جز یک زیرمجموعه از اندام‌ها که برای یک سال ثابت شده بودند، در فرمالین خنثی‌شده برای ۳ تا ۵ هفته قبل از فرآیند ثبت شدند. برای شبیه‌سازی تاخیر در فرآیند، نمونه‌ها به مدت ۲۴ ساعت اضافی در اتانول خالص، زینولن، پارافین مذاب یا ایستگاه جاسازی گرم قرار گرفتند. مواجهه طولانی با این مواد باعث تغییرات مورفولوژیک مشاهده‌شده‌ای نشد. کیفیت جاسازی، عملکرد میکروتومی و رنگ‌آمیزی هیستوشیمیایی در تمام شرایط آزمایشی ثابت بود. علاوه بر این، آنتی‌ژنیکتی IHC در اکثر شرایط به طور قابل توجهی حفظ شد. با این حال، واکنش‌پذیری ایمونولوژیک کاهش‌یافته یا مفقودشده در برخی نشانگرها در اندام‌های ثبت شده برای یک سال مشاهده شد که با گزارش‌های قبلی در مورد ماسک شدن آنتی‌ژن‌های مرتبط با ثبت و تخریب سایت‌های آنتی‌ژنیک همخوانی دارد. به طور غیرمنتظره، مواجهه طولانی با اتانول، زینولن یا پارافین عملکرد IHC را در نمونه‌های به‌درستی ثبت شده به طور مستقل تضعیف نکرد.

متن کامل اصلی