Analysis of Chlamydia trachomatis Gene Function via Controlled Up- or Downregulation.

چکیده اصلی

Due to genome streamlining, many genes in the ~1 Mb genome of Chlamydia trachomatis are essential and cannot be deleted. Ectopic overexpression and CRISPRi-based knockdown are complementary genetic approaches to study the function of genes in C. trachomatis, including essential genes. When used in combination with inducible promoters, these tools allow researchers to determine how precise regulation of gene expression contributes to proper progression of the chlamydial developmental cycle. This chapter includes protocols which detail ectopic overexpression of a protein or conversely, transcriptional inhibition of a specific gene in C. trachomatis serovar L2/434/Bu.

ترجمه فارسی چکیده

به دلیل ساده‌سازی ژنوم، بسیاری از ژن‌ها در ژنوم حدود ۱ مگابایتی کلامیدیا تراکوماتیس حیاتی هستند و نمی‌توان آن‌ها را حذف کرد. ابرعبورت بیان و سرکوب مبتنی بر CRISPRi رویکرد‌های ژنتیکی تکمیلی برای مطالعه عملکرد ژن‌ها در C. trachomatis، از جمله ژن‌های حیاتی، هستند. هنگام استفاده در کنار پروموتورهای قابلیت تحریک، این ابزارها به محققان اجازه می‌دهند تا تعیین کنند که چگونه تنظیم دقیق بیان ژن به پیشرفت صحیح چرخه تکاملی کلامیدی کمک می‌کند. این فصل شامل پروتکل‌هایی است که بیان ectopic یک پروتئین یا به طور متقابل، سرکوب ترجمه یک ژن خاص در سرووار L2/434/Bu را توضیح می‌دهد.

متن کامل اصلی