Live Imaging of Ions in Cells Infected with Chlamydia trachomatis.

چکیده اصلی

This chapter describes methodological approaches for studying intracellular ion dynamics during Chlamydia trachomatis infection. It emphasizes the requirement for live-cell imaging to capture active and compartmentalized ion fluxes in infected cells precluded by fixed-cell techniques. Specifically, we present step-by-step protocols for labeling Chlamydia-infected cells with a fluorescent potassium ion (K+)-sensitive probe for performing live imaging with confocal microscopy or spinning disc confocal microscopy for higher resolution and procedures for image processing and quantification. We also describe time-lapse microscopy to monitor K+ dynamics over the extended time course of the infection. These advanced microscopy methods have the potential to visualize ion transport in real time at the host-pathogen interface.

ترجمه فارسی چکیده

این فصل رویکردهای روش‌شناختی برای مطالعه دینامیک‌های یونی درون‌سلولی در حین عفونت کلامیدیا تراکوماتیس را توصیف می‌کند. تأکید بر ضرورت تصویربرداری سلول زنده برای ثبت جریان‌های یونی فعال و متمایز شده است که با تکنیک‌های سلول ثابت ممکن نیست. به طور خاص، پروتکل‌های گام‌به‌گام برای برچسب‌گذاری سلول‌های آلوده با سنجنده فلورسنت یون پتاسیم (K+) برای انجام تصویربرداری با میکروسکوپ کانفوکال یا میکروسکوپ کانفوکال دیسک چرخان برای رزولوشن بالاتر و روش‌های پردازش و کمی‌سازی تصویر ارائه شده است. ما همچنین میکروسکوپی زمان‌سری برای نظارت بر دینامیک‌های K+ در طول دوره طولانی عفونت را توصیف می‌کنیم. این روش‌های پیشرفته میکروسکوپی پتانسیل مشاهده انتقال یون در زمان واقعی در مرز میزبان-عامل بیماری را دارند.

متن کامل اصلی