MicroRNA-135 alleviates cisplatin resistance in cervical cancer by inhibiting CD44v6.

چکیده اصلی

BACKGROUND: Cervical cancer (CC) remains a leading cause of cancer-related mortality worldwide and cisplatin resistance poses a major challenge to effective treatment. MicroRNA-135 (miR-135) has been implicated in tumor progression and drug resistance, but its role in cisplatin-resistant CC remains unclear. OBJECTIVES: To investigate whether miR-135 affects cisplatin resistance in CC cells by targeting CD44v6. METHODS: Bioinformatic analysis (TargetScan) was performed to predict the miR-135 binding site in CD44v6, followed by a dual-luciferase reporter assay. RT-qPCR and Western blot were used to measure miR-135 and CD44v6 expression in cisplatin-resistant HeLa/DDP cells, HeLa cells and normal Ect1/E6E7 cells. HeLa/DDP cells were transfected with miR-135 mimic or NC mimic and cell proliferation (CCK-8, colony formation), apoptosis (flow cytometry) and CD44v6 expression were assessed. RESULTS: miR-135 directly bound to the CD44v6 3'-UTR, reducing luciferase activity by 58% (*p* < 0.001). miR-135 expression was decreased by 68% in HeLa/DDP cells compared to Ect1/E6E7 cells, while CD44v6 expression was increased 3.5-fold. miR-135 mimic transfection reduced CD44v6 protein expression by 62%, decreased cell viability by 57.3%, increased the apoptosis rate from 12.4% to 35.8% (absolute increase of 23.4%) and lowered the cisplatin IC50 from 22.36 to 8.47 μmol/L (2.64-fold reversal, *p* < 0.001). CONCLUSIONS: miR-135 overexpression was associated with reduced CD44v6 expression, decreased proliferation, increased apoptosis and enhanced sensitivity to cisplatin in HeLa/DDP cells. These findings demonstrate an inverse association between miR-135 and CD44v6 in cisplatin-resistant CC cells; however, causal mechanistic evidence (e.g., via CD44v6-specific knockdown or rescue experiments) is not provided. Further studies are required to establish whether CD44v6 directly mediates the chemosensitizing effects of miR-135.

ترجمه فارسی چکیده

سرطان گردن رحم (CC) همچنان یکی از دلایل اصلی مرگ‌ومیر ناشی از سرطان در جهان است و مقاومت به سیس‌پلاتین چالش بزرگی برای درمان مؤثر است. میکرو-RNA-135 (miR-135) در پیشرفت تومور و مقاومت دارویی درگیر شده است، اما نقش آن در CC مقاوم به سیس‌پلاتین روشن نیست. هدف بررسی این بود که آیا miR-135 با هدف‌گیری CD44v6 بر مقاومت به سیس‌پلاتین در سلول‌های CC اثر می‌گذارد. تحلیل‌های بیوانفورماتیک (TargetScan) برای پیش‌بینی محل اتصال miR-135 به CD44v6 انجام شد، به دنبال آن آزمایش گزارشگر دو لومرز. RT-qPCR و وسترن بلات برای اندازه‌گیری بیان miR-135 و CD44v6 در سلول‌های مقاوم به سیس‌پلاتین HeLa/DDP، سلول‌های HeLa و سلول‌های طبیعی Ect1/E6E7 استفاده شد. سلول‌های HeLa/DDP با miR-135 مایمیک یا مایمیک کنترل (NC) ترنسفکت شدند و رشد سلولی (CCK-8، تشکیل کلونی)، آپوپتوز (سیتوفتومتری جریان) و بیان CD44v6 ارزیابی شدند. miR-135 مستقیماً به 3'-UTR CD44v6 متصل شد و فعالیت لومرز را ۵۸٪ کاهش داد (*p* < ۰.۰۰۱). بیان miR-135 در سلول‌های HeLa/DDP نسبت به سلول‌های Ect1/E6E7 ۶۸٪ کاهش یافت، در حالی که بیان CD44v6 ۳.۵ برابر افزایش یافت. ترنسفکت miR-135 مایمیک بیان پروتئین CD44v6 را ۶۲٪ کاهش داد، ویژگی زنده‌ای سلولی را ۵۷.۳٪ کاهش داد، نرخ آپوپتوز را از ۱۲.۴٪ به ۳۵.۸٪ (افزایش مطلق ۲۳.۴٪) افزایش داد و IC50 سیس‌پلاتین را از ۲۲.۳۶ به ۸.۴۷ μmol/L کاهش داد (معکوس‌سازی ۲.۶۴ برابری، *p* < ۰.۰۰۱). miR-135 بیش‌برازش با کاهش بیان CD44v6، کاهش رشد، افزایش آپوپتوز و افزایش حساسیت به سیس‌پلاتین در سلول‌های HeLa/DDP مرتبط است. این یافته‌ها همبستگی معکوس بین miR-135 و CD44v6 در سلول‌های CC مقاوم به سیس‌پلاتین را نشان می‌دهند، اما شواهد مکانیسمی علت‌گرایی (مانند حذف اختصاصی CD44v6 یا آزمایش‌های نجات) ارائه نشده است. مطالعات بیشتری برای اثبات اینکه آیا CD44v6 مستقیماً اثر حساس‌ساز شیمی‌درمانی miR-135 را می‌رساند، مورد نیاز است.

متن کامل اصلی