Strain-resolved metabolomic chemotyping identifies tryptophan and γ-glutamyl peptides as MGO-AGEs breaking postbiotic compounds for carbonyl stress mitigation.

چکیده اصلی

Carbonyl stress, characterized by pathological accumulation of reactive dicarbonyl species such as methylglyoxal (MGO), disrupts mitochondrial function and drives formation of advanced glycation end-products (AGEs), and is implicated in chronic neurobehavioral and metabolic disorders. Here, we established a strain-resolved activity metabolomics framework to rationally select postbiotic extracts with MGO-AGEs breaking activity. We screened a postbiotic library of 177 intracellular metabolite extracts from 113 bacterial strains by untargeted metabolite profiling and in vitro MGO-AGEs breaking activity. Comparative analysis revealed that strain-level chemotypes within Limosilactobacillus fermentum showed marked differences in functional activity that were not apparent at the species level. Using this framework, we selected the postbiotic extract LFEAN031 based on strain-level enrichment of MGO-AGEs breaking compounds, including tryptophan, asparagine, and three γ-glutamyl peptides (GGPs), and evaluated its efficacy in an MGO-induced carbonyl stress mouse model. Oral LFEAN031 administration restored MGO-induced colon length shortening and increased colonic expression of the tight junction protein ZO-1, while lowering serum interleukin-6 (IL-6), cortisol, and reducing hypothalamic glucocorticoid receptor expression, indicating attenuation of hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis hyperactivation and inflammatory responses. Depressive- and anxiety-like behaviors also improved. These phenotypic improvements were accompanied by altered cecal GGP-related pathways, with increased levels of the three bioactive GGPs and redox-related metabolites, alongside a shift in tryptophan metabolism toward protective indole derivatives and 5-hydroxytryptophan, with reduced levels of the neurotoxic metabolites 3-indoxyl sulfate and xanthurenic acid. These findings provide proof-of-concept for a metabolite-guided strategy for postbiotic discovery and demonstrate the capacity of microbial metabolites to modulate gut-brain axis function under carbonyl stress.

ترجمه فارسی چکیده

استرس کربونیل، که با تجمع بیماری‌زا گونه‌های دی‌کربونیل واکنش‌گر مانند متیل‌گلیوکسال (MGO) مشخص می‌شود، عملکرد میتوکندری را مختل کرده و تشکیل محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته (AGE) را تشویق می‌کند و در اختلالات مزمن عصبی-رفتاری و متابولیک دخیل است. در اینجا، ما یک چارچوب متابولیکی فعالیت با تفکیک استرین برای انتخاب عمدی استخراج‌های پس‌بیوتیک با فعالیت شکست‌دهنده MGO-AGE ایجاد کردیم. ما با پروفایل‌سازی متابولیتیک بدون هدف و فعالیت شکست‌دهنده MGO-AGE در vitro، یک کتابخانه پس‌بیوتیک از ۱۷۷ استخراج متابولیتیک سلولی از ۱۳۳ استرین باکتریایی را غربالگری کردیم. تحلیل مقایسه‌ای نشان داد که تایپ‌های شیمیایی سطح استرین در *Limosilactobacillus fermentum* تفاوت‌های قابل توجهی در فعالیت عملکردی داشتند که در سطح گونه دیده نمی‌شد. با استفاده از این چارچوب، ما استخراج پس‌بیوتیک LFEAN031 را بر اساس غنی‌سازی سطح استرین ترکیبات شکست‌دهنده MGO-AGE، از جمله تریپتوفان، آسپارagine و سه پپتید گاما-گلوتامیل (GGP)، انتخاب کردیم و اثربخشی آن را در مدل موش استرس کربونیل ناشی از MGO ارزیابی کردیم. تجویز دهانی LFEAN031 کوتاهی طول کولون ناشی از MGO را بازگرداند و بیان پروتئین اتصال‌دهنده تنگ ZO-1 در کولون را افزایش داد، در حالی که سطح سرم اینترلوکین-۶ (IL-6) و کورتیزول را کاهش داد و بیان گیرنده گلوکوکورتیکوئید هیپوتالامسی را کاهش داد، که نشان‌دهنده تعدیل فعال‌سازی بیش از حد محور هیپوتالامسی-غده‌ای فوق‌کلیوی (HPA) و پاسخ‌های التهابی بود. رفتارهای افسردگی‌مانند و اضطرابی نیز بهبود یافتند. این بهبودهای فنوتیپی همراه با مسیرهای مرتبط با GGP در کیسه‌روده تغییر یافت، همراه با افزایش سطح سه GBP بیولوژیک فعال و متابولیت‌های مرتبط با ردوکس، همراه با تغییر مسیر متابولیسم تریپتوفان به سمت مشتقات محافظت‌کننده ایندول و ۵-هیدروکسی‌تریپتوفان، همراه با کاهش سطح متابولیت‌های سمی عصبی ۳-ایندوکسیل سولفات و اسید خاکی‌زرد بود. این یافته‌ها اثبات مفهومی برای یک استراتژی هدایت‌شده توسط متابولیت برای کشف پس‌بیوتیک و نشان‌دهنده ظرفیت متابولیت‌های میکروبی برای تنظیم عملکرد محور روده-مغز در شرایط استرس کربونیل هستند.

متن کامل اصلی