miR-185 influences Cdc42-N-WASP signaling pathway in gastric cancer by targeting CTTN.

چکیده اصلی

BACKGROUND: miR-185 expression is dysregulated in various tumors, but its role in gastric cancer remains unclear. OBJECTIVES: To investigate miR-185 expression and clinical significance in gastric cancer, explore its effects on malignant phenotypes and preliminarily elucidate the underlying mechanism. METHODS: Real-time polymerase chain reaction (PCR) was used to detect miR-185 expression in 58 archived gastric cancer tissue samples and paired adjacent normal tissues obtained from a hospital biospecimen repository. In SGC-7901 and AGS cells, the effects of miR-185 modulation on proliferation, apoptosis, epithelial-mesenchymal transition (EMT) and the cell division cycle protein 42 (Cdc42)-neural Wiskott-Aldrich syndrome protein (N-WASP) pathway were assessed using 5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) assay, flow cytometry, Western blot and dual-luciferase reporter assay. RESULTS: miR-185 expression was significantly downregulated in gastric cancer tissues and correlated with lymph node metastasis and advanced stage. In vitro, miR-185 overexpression inhibited proliferation, induced apoptosis, increased E-cadherin expression and decreased Vimentin, N-cadherin, Snail, Cdc42 and neural WASP expression. A dual-luciferase reporter assay confirmed that cortactin (CTTN) is a direct target of miR-185. These findings were consistent in both cell lines. CONCLUSION: miR-185 is downregulated in gastric cancer and its low expression correlates with lymph node metastasis and advanced TNM stage. In vitro experiments indicate that upregulation of miR-185 suppresses gastric cancer cell proliferation, induces apoptosis and reverses epithelial-mesenchymal transition, possibly by targeting CTTN and thereby affecting Cdc42 and N-WASP expression. This single-center, small-sample (n=58) in vitro study lacks in vivo validation; the findings require confirmation in larger, multicenter cohorts. Nevertheless, this study provides the first experimental evidence for the miR-185/CTTN/Cdc42-N-WASP axis in gastric cancer.

ترجمه فارسی چکیده

پس‌زمینه: بیان miR-185 در انواع تومورها دچار ناهنجاری است، اما نقش آن در سرطان معده روشن نیست. اهداف: بررسی بیان miR-185 و اهمیت بالینی آن در سرطان معده، بررسی تأثیرات آن بر ویژگی‌های بدخیم و توضیح اولیه مکانیسم زیربنایی. روش‌ها: از PCR زمان‌واقعی برای تشخیص بیان miR-185 در ۵۸ نمونه بافت سرطان معده و بافت‌های نرمال مجاور استفاده شد. در سلول‌های SGC-7901 و AGS، اثرات تنظیم miR-185 بر تکثیر، آپوپتوز، انتقال اپیتلیوم-مایوموسیتیک (EMT) و مسیر Cdc42-N-WASP با آزمون EdU، سیتومتری جریان، وایت‌بلت و آزمون گزارش‌دهنده دو لوتینز بررسی شد. نتایج: بیان miR-185 به طور معناداری در بافت‌های سرطان معده کاهش یافته و با متاستاز لنفاوی و مرحله پیشرفته همبستگی دارد. در آزمایشگاه، افزایش بیان miR-185 تکثیر را مهار کرد، آپوپتوز را القا کرد، بیان E-cadherin را افزایش داد و بیان Vimentin، N-cadherin، Snail، Cdc42 و N-WASP را کاهش داد. آزمون دو لوتینز تأیید کرد که cortactin (CTTN) هدف مستقیم miR-185 است. نتیجه‌گیری: miR-185 در سرطان معده کاهش یافته و بیان پایین آن با متاستاز لنفاوی و مرحله TNM پیشرفته همبستگی دارد. آزمایش‌های آزمایشگاهی نشان می‌دهند که افزایش miR-185 تکثیر سلول‌های سرطان معده را مهار می‌کند، آپوپتوز را القا می‌کند و انتقال اپیتلیوم-مایوموسیتیک را معکوس می‌کند، احتمالاً از طریق هدف‌گیری CTTN و thereby affecting Cdc42 و N-WASP.

متن کامل اصلی