MiR-326 targets ETS1 to activate PI3K/Akt signaling and promote malignant phenotypes in gastric cancer cells.

چکیده اصلی

BACKGROUND: Gastric cancer (GC) remains a leading cause of cancer-related mortality worldwide and effective therapeutic targets remain limited. OBJECTIVES: This study aimed to investigate the expression and functional role of miR-326 in gastric cancer, identify its direct target gene and elucidate the underlying molecular mechanisms involving the PI3K/Akt signaling pathway and the regulation of inflammatory cytokines. METHODS: miR-326 expression was detected by qRT-PCR in 56 paired GC tissues and adjacent normal tissues, as well as in GC cell lines (SGC-7901, MKN-45, AGS) and normal GES-1 cells. CCK-8 assays, flow cytometry, Transwell migration/invasion assays and ELISA were performed to assess cell proliferation, apoptosis, migration/invasion and cytokine secretion. Dual-luciferase reporter assay and Western blotting were used to validate the target gene and pathway activation. RESULTS: miR-326 was significantly upregulated in GC tissues and cell lines. ETS1 was identified as a direct target of miR-326. Overexpression of miR-326 reduced ETS1 expression, activated the PI3K/Akt pathway (increased p-PI3K and p-AKT), promoted cell proliferation, migration and invasion, inhibited apoptosis and induced an imbalance of inflammatory cytokines (increased IL-6 and TNF-α; decreased IL-10 and IL-17). Co-overexpression of ETS1 or treatment with the PI3K inhibitor LY294002 reversed these effects. CONCLUSIONS: miR-326 promotes malignant phenotypes in gastric cancer cells by targeting ETS1, activating the PI3K/Akt signaling pathway, and inducing dysregulation of inflammatory cytokines. The miR-326/ETS1/PI3K/Akt axis may serve as a potential diagnostic biomarker and therapeutic target for gastric cancer.

ترجمه فارسی چکیده

پژوهش حاضر به بررسی بیان و نقش عملکردی miR-326 در سرطان معده، شناسایی ژن هدف مستقیم آن و elucidation مکانیسم‌های مولکولی درگیر شامل مسیر PI3K/Akt و تنظیم سیتوکین‌های التهابی پرداخت. بیان miR-326 با استفاده از qRT-PCR در ۵۶ جفت بافت سرطان معده و بافت‌های نرمال مجاور، همچنین در خطوط سلولی سرطان معده (SGC-7901، MKN-45، AGS) و سلول‌های نرمال GES-1 اندازه‌گیری شد. آزمون‌های CCK-8، سیتومتری جریان، آزمون‌های مهاجرت/تسلط Transwell و ELISA برای ارزیابی تکثیر سلولی، آپوپتوز، مهاجرت/تسلط و ترشح سیتوکین انجام شد. آزمون گزارش‌دهنده دو لومرز و وسترن بلات انجام شد تا ژن هدف و فعال‌سازی مسیر تأیید گردد. miR-326 به طور معنی‌داری در بافت‌ها و سلول‌های سرطان معده افزایش یافت. ETS1 به عنوان یک هدف مستقیم miR-326 شناسایی شد. افزایش بیان miR-326 بیان ETS1 را کاهش داد، مسیر PI3K/Akt را فعال کرد (افزایش p-PI3K و p-AKT)، تکثیر، مهاجرت و تسلط سلولی را تشدید کرد، آپوپتوز را مهار کرد و تعادل سیتوکین‌های التهابی را به هم زد (افزایش IL-6 و TNF-α؛ کاهش IL-10 و IL-17). هم‌افزایی ETS1 یا درمان با مهارکننده PI3K LY294002 این اثرات را معکوس کرد. miR-326 با هدف قرار دادن ETS1، فعال‌سازی مسیر PI3K/Akt و ایجاد بی‌نظمی سیتوکین‌های التهابی، پدیده‌های بدخیمی را در سلول‌های سرطان معده تشدید می‌نماید. محور miR-326/ETS1/PI3K/Akt می‌تواند به عنوان یک نشانگر بالینی بالقوه و هدف درمانی برای سرطان معده عمل کند.

متن کامل اصلی