Exploring the role of TNF/TNFR superfamily and NF-κB pathway in regulating B7/CD28 expression in rheumatoid arthritis: An in-vitro study.

چکیده اصلی

BACKGROUND: The TNF/TNFR superfamily and B7/CD28 costimulatory molecules are critical regulators of immune responses; however, their interplay in rheumatoid arthritis (RA) remains unclear. OBJECTIVES: To investigate whether the TNF/TNFR superfamily regulates B7/CD28 expression via the NF-κB pathway in RA and to evaluate its effects on synovial cell inflammation and apoptosis. METHODS: Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and fibroblast-like synoviocytes (FLS) were obtained from 40 patients with active rheumatoid arthritis (RA) (13 males, 27 females; mean age 42.3 ± 8.1 years, range 26-55; DAS28-ESR > 3.2) and 40 age- and sex-matched healthy controls (15 males, 25 females; mean age 41.8 ± 7.9 years, range 26-54) with no history of arthritis or autoimmune diseases; all participants provided written informed consent. A co-culture system of PBMCs and FLS was established and divided into three groups: control (healthy PBMCs + FLS), model (RA PBMCs + FLS) and inhibition (RA PBMCs + FLS treated with PDTC, an NF-κB inhibitor). After 48 hours, cell viability, apoptosis, inflammatory cytokines (TNF-α, IL-1β), COX-2, Bax, Bcl-2, TNF-R1/TNF-R2 mRNA and the expression of CD28 and CD80 on CD4+ and CD8+ T cells were assessed. RESULTS: Compared to controls, the model group exhibited increased FLS viability, reduced apoptosis, elevated levels of TNF-α, IL-1β, COX-2, Bcl-2 and TNF-R1/R2 mRNA, along with decreased Bax expression and lower CD28/CD80 expression on CD4+ T cells (all P < 0.05). NF-κB inhibition with PDTC significantly reduced FLS viability and increased apoptosis, downregulated IL-1β and COX-2 and restored CD28/CD80 expression on CD4+ T cells (P < 0.05), but did not alter TNF-α or TNFR mRNA levels. CONCLUSION: Inhibition of the NF-κB pathway attenuates RA-FLS inflammation and restores B7/CD28 expression on T cells; however, these effects were not directly mediated by changes in TNF/TNFR expression.

ترجمه فارسی چکیده

هدف این مطالعه بررسی این بود که آیا خانواده TNF/TNFR از طریق مسیر NF-κB بیان B7/CD28 را در آرتریت روماتوئید (AR) تنظیم می‌کند و تأثیر آن بر التهاب و آپوپتوز سلول‌های سینوویال را ارزیابی می‌کند. سلول‌های خونی منونوکلئار خون محیطی (PBMC) و سلول‌های سینوویال شبیه فیبروبلاست (FLS) از ۴۰ بیمار فعال AR و ۴۰ کنترل سالم (همگن‌سازی شده از نظر سن و جنسیت) به دست آمدند. یک سیستم هم‌کشت PBMC و FLS ایجاد شد و به سه گروه تقسیم شد: کنترل (PBMC سالم + FLS)، مدل (PBMC AR + FLS) و مهار (PBMC AR + FLS درمان شده با PDTC، مهارکننده NF-κB). پس از ۴۸ ساعت، باقی‌مانندگی سلولی، آپوپتوز، سیتوکین‌های التهابی (TNF-α، IL-1β)، COX-2، Bax، Bcl-2، mRNA TNF-R1/TNF-R2 و بیان CD28 و CD80 بر روی سلول‌های T CD4+ و CD8+ ارزیابی شد. نتایج نشان داد که در گروه مدل نسبت به کنترل، باقی‌مانندگی FLS افزایش، آپوپتوز کاهش، سطوح TNF-α، IL-1β، COX-2، Bcl-2 و mRNA TNF-R1/R2 افزایش و بیان Bax کاهش یافته است. مهار NF-κB با PDTC باعث کاهش باقی‌مانندگی FLS و افزایش آپوپتوز، کاهش IL-1β و COX-2 و بازگردانی بیان CD28/CD80 بر روی سلول‌های T CD4+ شد، اما سطوح TNF-α یا mRNA TNFR را تغییر نداد. نتیجه‌گیری نشان می‌دهد که مهار مسیر NF-κB التهاب FLS در AR را کاهش می‌دهد و بیان B7/CD28 بر روی سلول‌های T را بازمی‌گرداند، اما این تأثیرات مستقیماً توسط تغییرات بیان TNF/TNFR mediated نمی‌شوند.

متن کامل اصلی